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ELISA試劑盒操作時包括6個步驟：
1）抗原或抗體吸附于固相
2）加標本和試劑
3）孵育和沖洗
4）加酶標抗原或抗體
5）加適當的底物
6）檢測和分析結果

實驗時標本的處理：
A、請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。
B、實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高，應對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數，標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
C、若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。
D、使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。
E、若樣本為細胞培養上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態、細胞數量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。
F、某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。
G、建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。